Dinámica in vitro de biopelículas de la microbiota vaginal y de Listeria monocytogenes, Streptococcus agalactiae y Escherichia coli sobre la membrana amniótica

Alicia Farinati, Marisa Arcos, Melina Marqués, Adrian Orsini, Daniel Semeshchenko, Agustina Souto, Rubén Villanueva

Resumen


La biopelícula de Streptococcus agalactiae (SGB) produce infecciones neonatales severas. Las investigaciones que se llevan a cabo no incluyen generalmente la evaluación de la formación de biopelícula (BP) que se considera factor de virulencia, resistencia y barrera inmunológica. Nuestro objetivo fue demostrar la influencia del pH en la formación de las BP. Estudiamos 12 aislamientos de muestras urogenitales. Se efectuó la determinación de la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) con la clindamicina (CLI) a pH 4.0; 7.3 y 9.0. La formación de las BP se efectuó con técnicas propias y se estudiaron cuali y cuantitativamente.En síntesis cada aislamiento se inoculó en Trypticase Soja Caldo (TSC) a pH 4.0; 7.3 y 9.0 y un dispositivo de vidrio (DV) se colocó en cada uno. Se efectuaron los respectivos controles. La incubación se efectuó a 36°C y se observaron con microscopía óptica a las 6, 12, 24 y 48 horas previa tinción con cristal violeta. El estudio cuantitativo se efectuó con microplacas de 96 pocillos planos, se incubaron de igual manera y se leyeron con espectrofotómetro (RT 2100C absorbance mode: 450 nm). La CIM para CLI fue a pH 7.3 de 0.25 mg/l en 6/12 y de 0.5 mg/l en 6/12; a pH 9.0 fue de 0.125 mg/l en 1/12; 1.0 mg/l en 8/12 y de 2.0 mg/l en 3/12. Todos los aislamientos formaron BP pero su producción estuvo relacionada al aislamiento y no hubo diferencias significativas a los diferentes pH. En algunos se observó incremento de la BP con el incremento del pH como en la cepa 2 intensamente hemolítica. Nuestro estudio sugiere que todos forman BP a diferentes pH y que aquellos aislamientos que incrementan su BP a pH >4.5 podrían tener ventajas de sobrevida en la vagina ya sea cuando hay vaginitis aeróbicas por SGB pero sobre todo cuando acompañan a patologías endógenas con pH elevado como vaginosis bacteriana con el consiguiente riesgo perinatal en la mujer embarazada. CLI tuvo mejor actividad a pH elevados que le pueden proporcionar ventajas sobre otros antibióticos debido a su capacidad de penetrar en la BP y de actuar sobre el exopolímero.

Palabras clave


membrana amniótica; biopelículas; microbiota vaginal; Streptococcus agalactiae

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